随需应变CryoET迷你专题讨论会:样品制备- CryoET和SPA的主要局限性

2021年7月14日|消息类型: 技术:

你对TEM样品制备技术的最新进展感到好奇吗?

单粒子分析(SPA)和低温电子层析成像(cryoelectron tomography, cryoET)工作流程在结构生物学研究中的普及和应用呈指数级增长。不幸的是,由于样品制备相关的高失败率,这两种技术的成功在很大程度上受到限制。考虑到不断增长的对CryoEM/ET数据的需求以及与cryoTEM设备操作相关的巨大成本,克服这个问题是势在必行的。

请加入我们即将举行的小型研讨会,Peter J. Peters博士(马斯特里赫特大学)和Stefan Raunser博士(马克斯普朗克研究所)将讨论CryoET和SPA样品制备仪器的进展,以及他们通过这些技术实现的令人兴奋的新研究。CryoSol的Giulia Weissenberger也将提供世界上第一个成功安装的VitroJet的最新情况,该装置于2021年5月在俄勒冈健康科学大学完成。


网络研讨会的细节

最初播出时间:美国东部时间2021年6月22日下午1点

主持人

Peter J. Peters,博士

马斯特里赫特大学著名大学教授,林堡主席,马斯特里赫特多模态分子成像研究所(M4I)联合主任

彼得斯博士将讨论Vitrojet背后的技术,他和他在马斯特里赫特大学(Maastricht University)的团队在开创这一技术方面发挥了重要作用。Vitrojet包括乙烷喷射、样品打印、机器人处理、露点控制和自动网格预剪切,与骤降冻结相比,网格质量提高了8-9倍。

Stefan Raunser博士

马克斯·普朗克分子生理研究所结构生物化学系主任
技术大学多特蒙德

Raunser博士将讨论他在马克斯·普朗克分子生理学研究所(Max Planck Institute of Molecular Physiology)协助开发的新的低温et冰污染减少技术。谷神星的冰防御系统已经证明,在样品制备过程中,通常会积累的非晶态冰减少了近100%,晶态冰减少了50%。

VitroJet安装更新

会韦森伯CryoSol-World

会韦森伯

188金宝搏app安卓下载应用科学家
CryoSol-World

Giulia将讨论VitroJet cryoEM样品制备系统背后的技术,以及这种创新技术的好处。她还将介绍世界上第一个成功安装的冷冻电子显微镜的最新情况,该装置使俄勒冈健康与科学大学的研究人员能够创建具有可重复的冰厚度和质量的冷冻电子显微镜样品。

主持人

悬崖Mathisen

TEM解决方案的销售188金宝搏app安卓下载和应用
英超利物浦足球俱乐部


摘要

了解冷冻电镜样品制备过程中无形的手

推荐者:Peter J. Peters,博士
马斯特里赫特多模态分子成像研究所(M4I)主任
马斯特里赫特大学杰出的大学教授和林堡主席
荷兰马斯特里赫特

文摘:

低温电子显微镜是结构生物学领域中一个非常有吸引力的研究方法。随着低温电子显微镜的迅速普及,样品制备必须不断发展以防止工作流程中的阻塞。对改良的显微镜样品的迫切需求导致了方法的多样化。本演讲的目的是分类和解释在制备用于电子显微镜的玻璃化样品的各种技术背后的原理,并将重点放在玻璃喷射器的优点和美丽。讨论了工作流程中的各个方面和挑战,从样品优化和载体到沉积和玻璃化。可靠和通用的标本制备仍然是一个挑战,我们希望提供指导方针,并提出未来的改进方向。我们也渴望听到您的合作建议,以改善技术。

在分子分辨率下获得肌节结构的流线型冷冻et工作流程

推荐者:Stefan Raunser博士
结构生物化学系主任兼科学委员
多特蒙德技术大学马克斯·普朗克分子生理学研究所
德国多特蒙德

文摘:

低温电子层析成像(cryo-ET)是一种新兴的高分辨率原位研究细胞结构和蛋白质结构的技术。在本报告中,我将介绍我们的最新硬件发展结构细胞生物学使用FIB铣削和低温et。然后我将解释我们如何使用这个工作流程来获得本地肌节的高分辨率结构,肌肉的力量产生和承重装置。我们的低温et重建揭示了肌动蛋白和肌球蛋白在a带、i带和z盘的三维组织和相互作用的分子细节,并证明α-肌动蛋白通过形成6 nm间距的双峰交联反平行肌动蛋白丝。肌凝蛋白、原肌凝蛋白和肌动蛋白在~10 Å的结构进一步揭示了“双头”肌凝蛋白的两种构象,其中杠杆臂和轻链的灵活方向使肌凝蛋白不仅能与相同的肌动蛋白丝相互作用,而且还能在两个肌动蛋白丝之间分裂。我们的研究结果为脊椎动物骨骼肌的基本组织提供了意想不到的见解,并为未来肌肉疾病的研究奠定了坚实的基础。


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